Product Design, Manufacturing & Innovation Resources
Maison » Dosage MTT pour mesurer la viabilité cellulaire

Dosage MTT pour mesurer la viabilité cellulaire

1983
  • Tim Mosmann
Scientifique effectuant un test MTT dans un laboratoire de biologie cellulaire pour évaluer la viabilité des cellules.

(Image générée à titre d'illustration uniquement)

Le test MTT est une méthode colorimétrique permettant d'évaluer l'activité métabolique des cellules, qui sert d'indicateur de l'activité métabolique. procuration for cell viability, proliferation, and cytotoxicité. Viable cells with active mitochondria contain reductase enzymes that convert the yellow tetrazolium salt MTT (3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide) into an insoluble purple formazan. The amount of formazan produced is proportional to the number of living cells.

Le test MTT, décrit pour la première fois par Tim Mosmann en 1983, a révolutionné la façon dont les chercheurs quantifient les réponses cellulaires in vitro. Il offrait une alternative plus rapide, plus quantitative et moins radioactive aux méthodes précédentes comme le test de libération de chrome. Son principe repose sur l'activité des déshydrogénases mitochondriales dans les cellules vivantes. Ces enzymes font partie de la chaîne de transport d'électrons et ne sont actives que dans les cellules métaboliquement fonctionnelles.

In the procedure, the water-soluble yellow MTT reagent is added to cells in a culture plate. It is taken up by the cells and reduced by mitochondrial enzymes into formazan, which is an insoluble, purple, crystalline product. The formazan crystals accumulate within the cells. After an incubation period, a solubilizing agent, such as dimethyl sulfoxide (DMSO) or an acidified alcohol solution, is added to dissolve these crystals, resulting in a colored solution. The absorbance of this purple solution is then measured using a spectrophotometer at a specific wavelength (typically between 500 and 600 nm). The intensity of the color is directly proportional to the number of metabolically active, and therefore viable, cells. By comparing the absorbance of treated cells to untreated control cells, one can calculate the percentage of cytotoxicité or inhibition of proliferation caused by the test compound.

UNESCO Nomenclature: 2406
- Biologie de la cellule

Taper

Procédure médicale

Perturbation

Substantiel

Usage

Utilisation généralisée

Précurseurs

  • développement de techniques de culture cellulaire
  • compréhension de la respiration mitochondriale et de la chaîne de transport des électrons
  • invention du spectrophotomètre
  • utilisation des sels de tétrazolium comme indicateurs redox en histologie
  • besoin d'un test quantitatif et non radioactif de viabilité cellulaire

Applications

  • dépistage des effets cytotoxiques des médicaments dans la recherche sur le cancer
  • tests toxicologiques des produits chimiques
  • évaluer la prolifération cellulaire en réponse aux facteurs de croissance
  • criblage à haut débit dans la découverte de médicaments
  • biocompatibilité testing of materials

Brevets:

NA

Idées d'innovations potentielles

  • systèmes robotisés automatisés pour le criblage mtt à très haut débit
  • développement de dosages de formazan similaires, mais solubles dans l'eau (mts, xxt, wst-1) pour simplifier le protocole
  • multiplexage des tests mtt avec d'autres tests (par exemple, pour l'apoptose) dans le même puits
  • adaptation du test mtt pour les cultures cellulaires et organoïdes 3D
  • microfluidique devices incorporating mtt-based viability checks
  • utiliser des tests MTT pour rechercher des composés qui améliorent la fonction mitochondriale
  • développement de kits basés sur MTT pour les tests de toxicité de l'eau à domicile
  • intégration des lectures MTT dans les plateformes de découverte de médicaments pilotées par l'IA
  • en utilisant des réactifs mtt modifiés qui émettent une fluorescence au lieu de la couleur pour une sensibilité plus élevée
  • adapter le test pour mesurer la viabilité bactérienne et la sensibilité aux antibiotiques
En rapport avec : Test MTT, test de cytotoxicité, viabilité cellulaire, test colorimétrique, formazan, activité mitochondriale, toxicologie, criblage de médicaments, criblage à haut débit, spectrophotométrie.

Contexte historique

Dosage MTT pour mesurer la viabilité cellulaire

1970
1975
1977
1983
1987
1990
1990
1970
1973
1975
1979
1983
1988
1990
1990

(si la date est inconnue ou non pertinente, par exemple « mécanique des fluides », une estimation arrondie de son émergence notable est fournie)

10e année anniversaire

Les images en pleine résolution et les téléchargements sont uniquement disponibles, et 100% gratuits, pour les membres inscrits.