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細胞生存率を測定するためのMTTアッセイ

1983
  • Tim Mosmann
細胞生物学の研究室で、細胞の生存率を評価するためのMTTアッセイを行う科学者。.

(画像はイメージです)

The MTT assay is a colorimetric method for assessing cell metabolic activity, which serves as a プロキシ for cell viability, proliferation, and 細胞毒性. Viable cells with active mitochondria contain reductase enzymes that convert the yellow tetrazolium salt MTT (3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide) into an insoluble purple formazan. The amount of formazan produced is proportional to the number of living cells.

1983年にティム・モスマンによって初めて発表されたMTTアッセイは、研究者が試験管内で細胞応答を定量化する方法に革命をもたらしました。これは、クロム放出アッセイなどの従来の方法に比べて、より迅速で定量性が高く、放射性物質の使用量が少ない代替手段となりました。その原理は、生細胞内のミトコンドリア脱水素酵素の活性に基づいています。これらの酵素は電子伝達系の一部であり、代謝的に機能している細胞でのみ活性を示します。

In the procedure, the water-soluble yellow MTT reagent is added to cells in a culture plate. It is taken up by the cells and reduced by mitochondrial enzymes into formazan, which is an insoluble, purple, crystalline product. The formazan crystals accumulate within the cells. After an incubation period, a solubilizing agent, such as dimethyl sulfoxide (DMSO) or an acidified alcohol solution, is added to dissolve these crystals, resulting in a colored solution. The absorbance of this purple solution is then measured using a spectrophotometer at a specific wavelength (typically between 500 and 600 nm). The intensity of the color is directly proportional to the number of metabolically active, and therefore viable, cells. By comparing the absorbance of treated cells to untreated control cells, one can calculate the percentage of 細胞毒性 or inhibition of proliferation caused by the test compound.

UNESCO Nomenclature: 2406
細胞生物学

タイプ

医療処置

混乱

実質的な

使用法

広く普及している

前駆物質

  • 細胞培養技術の開発
  • ミトコンドリア呼吸と電子伝達系の理解
  • 分光光度計の発明
  • 組織学における酸化還元指示薬としてのテトラゾリウム塩の使用
  • 定量的かつ非放射性の細胞生存率アッセイの必要性

アプリケーション

  • がん研究における細胞毒性効果の薬剤スクリーニング
  • 化学物質の毒性試験
  • 成長因子に対する細胞増殖反応の評価
  • 創薬におけるハイスループットスクリーニング
  • 生体適合性 testing of materials

特許:

NA

潜在的なイノベーションのアイデア

  • automated robotic systems for ultra-high-throughput mtt screening
  • development of similar, but water-soluble formazan assays (mts, xxt, wst-1) to simplify the protocol
  • multiplexing mtt assays with other assays (e.g., for apoptosis) in the same well
  • adaptation of the mtt assay for 3d cell cultures and organoids
  • マイクロ流体 devices incorporating mtt-based viability checks
  • using mtt assays to screen for compounds that enhance mitochondrial function
  • developing mtt-based kits for home water toxicity testing
  • integrating mtt readouts into ai-driven drug discovery platforms
  • using modified mtt reagents that emit fluorescence instead of color for higher sensitivity
  • adapting the assay to measure bacterial viability and antibiotic susceptibility
関連キーワード:MTTアッセイ、細胞毒性アッセイ、細胞生存率、比色アッセイ、ホルマザン、ミトコンドリア活性、毒性学、薬剤スクリーニング、ハイスループットスクリーニング、分光光度法。

歴史的背景

細胞生存率を測定するためのMTTアッセイ

1970
1975
1977
1983
1987
1990
1990
1970
1973
1975
1979
1983
1988
1990
1990

(日付が不明または関連性がない場合、例えば「流体力学」などでは、その注目すべき出現時期の概算値が提示されます。)

10年目 周年

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