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세포 생존율 측정을 위한 MTT 분석법

1983
  • Tim Mosmann
Scientist performing MTT assay in a cell biology laboratory for assessing cell viability.

(설명을 위한 생성된 이미지입니다)

The MTT assay is a colorimetric method for assessing cell metabolic activity, which serves as a 대리 for cell viability, proliferation, and 세포독성. Viable cells with active mitochondria contain reductase enzymes that convert the yellow tetrazolium salt MTT (3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide) into an insoluble purple formazan. The amount of formazan produced is proportional to the number of living cells.

1983년 팀 모스만(Tim Mosmann)이 처음 발표한 MTT 분석법은 연구자들이 시험관 내에서 세포 반응을 정량화하는 방식을 혁신적으로 변화시켰습니다. 이 분석법은 크롬 방출 분석법과 같은 기존 방법에 비해 더 빠르고, 더 정량적이며, 방사능 노출도 적은 대안을 제공했습니다. MTT 분석법의 원리는 살아있는 세포 내 미토콘드리아 탈수소효소의 활성에 기반합니다. 이 효소는 전자 전달 사슬의 일부이며, 대사 활동이 활발한 세포에서만 활성화됩니다.

In the procedure, the water-soluble yellow MTT reagent is added to cells in a culture plate. It is taken up by the cells and reduced by mitochondrial enzymes into formazan, which is an insoluble, purple, crystalline product. The formazan crystals accumulate within the cells. After an incubation period, a solubilizing agent, such as dimethyl sulfoxide (DMSO) or an acidified alcohol solution, is added to dissolve these crystals, resulting in a colored solution. The absorbance of this purple solution is then measured using a spectrophotometer at a specific wavelength (typically between 500 and 600 nm). The intensity of the color is directly proportional to the number of metabolically active, and therefore viable, cells. By comparing the absorbance of treated cells to untreated control cells, one can calculate the percentage of 세포독성 or inhibition of proliferation caused by the test compound.

UNESCO Nomenclature: 2406
세포 생물학

유형

의료 절차

분열

상당한

용법

널리 사용됨

전구체

  • 세포 배양 기술의 발전
  • 미토콘드리아 호흡과 전자 전달 사슬에 대한 이해
  • 분광광도계의 발명
  • 조직학에서 산화환원 지표로서 테트라졸륨염의 사용
  • 정량적이고 비방사성 세포 생존율 분석법의 필요성

응용 프로그램

  • 암 연구에서 세포독성 효과를 확인하기 위한 약물 스크리닝
  • 화학물질의 독성 시험
  • 성장 인자에 대한 세포 증식 반응 평가
  • high-throughput screening in drug discovery
  • 생체적합성 testing of materials

특허:

NA

잠재적 혁신 아이디어

  • automated robotic systems for ultra-high-throughput mtt screening
  • development of similar, but water-soluble formazan assays (mts, xxt, wst-1) to simplify the protocol
  • multiplexing mtt assays with other assays (e.g., for apoptosis) in the same well
  • adaptation of the mtt assay for 3d cell cultures and organoids
  • 미세유체 devices incorporating mtt-based viability checks
  • using mtt assays to screen for compounds that enhance mitochondrial function
  • developing mtt-based kits for home water toxicity testing
  • integrating mtt readouts into ai-driven drug discovery platforms
  • using modified mtt reagents that emit fluorescence instead of color for higher sensitivity
  • adapting the assay to measure bacterial viability and antibiotic susceptibility
관련 용어: MTT 분석, 세포독성 분석, 세포 생존율, 비색 분석, 포르마잔, 미토콘드리아 활성, 독성학, 약물 스크리닝, 고처리량 스크리닝, 분광광도법.

역사적 맥락

세포 생존율 측정을 위한 MTT 분석법

1970
1975
1977
1983
1987
1990
1990
1970
1973
1975
1979
1983
1988
1990
1990

(날짜를 알 수 없거나 관련이 없는 경우, 예를 들어 "유체역학"의 경우, 주목할 만한 등장 시기를 대략적으로 추정하여 제공합니다.)

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