Product Design, Manufacturing & Innovation Resources
Casa » Macchia del sud

Macchia del sud

1975
  • Edwin Southern
Scena di laboratorio che dimostra la tecnica del Southern blot per l'analisi del DNA in genetica molecolare.

(Immagine generata a solo scopo illustrativo)

La macchia meridionale è una metodo Utilizzata per l'individuazione di una specifica sequenza di DNA in un campione di DNA, questa tecnica combina il trasferimento di frammenti di DNA separati mediante elettroforesi su una membrana filtrante con la successiva individuazione dei frammenti tramite una sonda di DNA marcata. La tecnica consente ai ricercatori di identificare un gene specifico all'interno di una miscela complessa di DNA in base alle dimensioni e alla sequenza.

The Southern blot, named after its inventor Edwin Southern, is a powerful and specific method for detecting a target DNA sequence within a complex mixture of DNA. It was a foundational technique in molecular genetics before the widespread adoption of PCR and sequencing. The process is a multi-step procedure that combines size separation with specific molecular recognition. It begins with the digestion of the total genomic DNA sample using one or more restriction enzymes, which cleaves the DNA into fragments of varying sizes. These fragments are then separated according to their size by agarose gel electrophoresis. The gel now contains a smear of countless DNA fragments, sorted by length. The crucial next step is the transfer, or ‘blotting,’ of these separated DNA fragments from the fragile gel onto a more durable membrane, typically made of nitrocellulose or nylon. This is achieved through capillary action, which wicks a buffer solution through the gel and the membrane, carrying the DNA along with it and immobilizing it on the membrane’s surface. The DNA is first denatured into single strands so it can bind to the probe. The membrane now holds a faithful replica of the DNA fragment pattern from the gel. To find the specific gene of interest among the thousands of fragments, a labeled probe is used. This probe is a single-stranded piece of DNA (or RNA) that has a sequence complementary to the target gene and is tagged with a marker, such as a radioactive isotope ([latex]^{32}P[/latex]) or a fluorescent/chemiluminescent molecule. The membrane is incubated with this probe, which hybridizes (forms a double helix) only with its complementary DNA fragment on the membrane. After washing away any unbound probe, the location of the hybridized probe is detected, revealing a band that corresponds to the size of the DNA fragment containing the target gene.

UNESCO Nomenclature: 2406
- Biologia molecolare

Tipo

Processo chimico

Interruzione

Incrementale

Utilizzo

Nicchia/Specializzato

Precursori

  • elettroforesi su gel per la separazione del DNA
  • scoperta degli enzimi di restrizione
  • comprensione dei principi di ibridazione del DNA
  • sviluppo di tecniche di marcatura radioattiva per sonde
  • tecniche per la creazione di membrane di nitrocellulosa

Applicazioni

  • mappatura genetica
  • diagnosi di malattie genetiche (ad esempio, anemia falciforme)
  • identificazione di mutazioni o riarrangiamenti genici
  • analisi forense del DNA (RFLP)
  • test di paternità
  • rilevamento di transgeni negli OGM

Brevetti:

NA

Idee e potenziali innovazioni

A causa dell'eliminazione del traffico generato dai bot, che attualmente supera i 40.000 al giorno, questo contenuto è riservato ai membri della community.
> Accedi O > Registrati L'accesso a questo contenuto, così come a tutti gli altri contenuti e strumenti riservati, è (100% gratuito).

Related to: Southern blot, Edwin Southern, DNA detection, hybridization, DNA probe, RFLP, blotting, molecular biology, gene identification, electrophoresis.

Contesto storico

Macchia del sud

1960
1970
1973
1975
1979
1983
1988
1960
1967
1970
1975
1977
1983
1987
1990

(se la data è sconosciuta o non rilevante, ad esempio "meccanica dei fluidi", viene fornita una stima approssimativa della sua notevole comparsa)

Invenzioni, innovazioni e principi tecnici correlati

Le immagini a grandezza naturale e i download sono disponibili, 100% gratuitamente, solo per i membri registrati.

> Login <