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MTT 检测法测定细胞活力

1983
  • Tim Mosmann
科学家在细胞生物学实验室进行 MTT 检测,评估细胞活力。

(图片仅供参考)

MTT 法是一种比色法。 方法 用于评估细胞代谢活性,这可以作为…… 代理人 用于检测细胞活力、增殖和细胞毒性。具有活性线粒体的活细胞含有还原酶,可将黄色四唑盐 MTT(3-(4,5-二甲基噻唑-2-基)-2,5-二苯基四唑溴化物)转化为不溶性紫色甲臜。生成的甲臜量与活细胞数量成正比。

MTT 检测法由 Tim Mosmann 于 1983 年首次提出,彻底改变了研究人员体外定量细胞反应的方式。它提供了一种比铬释放检测法等先前方法更快、更定量且放射性更低的替代方法。其原理基于活细胞中线粒体脱氢酶的活性。这些酶是电子传递链的一部分,仅在代谢功能正常的细胞中活跃。

在该过程中,将水溶性的黄色MTT试剂添加到培养板中的细胞中。MTT试剂被细胞吸收,并被线粒体酶还原成甲臜(formazan),这是一种不溶性的紫色结晶产物。甲臜晶体在细胞内积聚。孵育一段时间后,加入增溶剂,例如二甲基亚砜 (DMSO) 或酸化酒精溶液,溶解这些晶体,从而得到有色溶液。然后使用分光光度计在特定波长(通常在 500 至 600 nm 之间)测量该紫色溶液的吸光度。颜色的强度与代谢活跃(因此是活细胞)的数量成正比。通过比较处理过的细胞和未处理的对照细胞的吸光度,可以计算出测试化合物引起的细胞毒性或增殖抑制的百分比。

UNESCO Nomenclature: 2406
- 细胞生物学

类型

医疗程序

中断

重大的

用法

广泛使用

前体

  • 细胞培养技术的发展
  • 了解线粒体呼吸和电子传递链
  • 分光光度计的发明
  • 四唑盐作为组织学氧化还原指示剂的应用
  • 需要进行定量、非放射性细胞活力测定

应用程序

  • 癌症研究中的细胞毒性药物筛选
  • 化学品毒理学测试
  • 评估细胞对生长因子的增殖反应
  • 药物研发中的高通量筛选
  • 材料生物相容性测试

专利:

NA

潜在创新理念

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相关领域:MTT 检测、细胞毒性检测、细胞活力检测、比色法检测、甲臜、线粒体活性、毒理学、药物筛选、高通量筛选、分光光度法。

历史背景

MTT 检测法测定细胞活力

1970
1975
1977
1983
1987
1990
1990
1970
1973
1975
1979
1983
1988
1990
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(如果日期未知或不相关,例如“流体力学”,则提供其显著出现的近似估计)

相关发明、创新和技术原理

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