(صورة توضيحية فقط)
البقعة الجنوبية هي طريقة تُستخدم هذه التقنية للكشف عن تسلسل محدد من الحمض النووي في عينة من الحمض النووي. وتجمع بين نقل شظايا الحمض النووي المفصولة بالرحلان الكهربائي إلى غشاء ترشيح، ثم الكشف عن هذه الشظايا بواسطة مسبار حمض نووي موسوم. تُمكّن هذه التقنية الباحثين من تحديد جين معين ضمن خليط معقد من الحمض النووي بناءً على حجمه وتسلسله.
تُعدّ تقنية ساوثرن بلوت، التي سُمّيت نسبةً إلى مخترعها إدوين ساوثرن، طريقةً فعّالة ودقيقة للكشف عن تسلسل الحمض النووي المستهدف ضمن خليط معقد من الحمض النووي. وقد كانت تقنيةً أساسيةً في علم الوراثة الجزيئية قبل اعتمادها على نطاق واسع. تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) and sequencing. The process is a multi-step procedure that combines size separation with specific molecular recognition. It begins with the digestion of the total genomic DNA sample using one or more restriction enzymes, which cleaves the DNA into fragments of varying sizes. These fragments are then separated according to their size by agarose gel electrophoresis. The gel now contains a smear of countless DNA fragments, sorted by length. The crucial next step is the transfer, or ‘blotting,’ of these separated DNA fragments from the fragile gel onto a more durable membrane, typically made of nitrocellulose or nylon. This is achieved through capillary action, which wicks a buffer solution through the gel and the membrane, carrying the DNA along with it and immobilizing it on the membrane’s surface. The DNA is first denatured into single strands so it can bind to the probe. The membrane now holds a faithful replica of the DNA fragment pattern from the gel. To find the specific gene of interest among the thousands of fragments, a labeled probe is used. This probe is a single-stranded piece of DNA (or RNA) that has a sequence complementary to the target gene and is tagged with a marker, such as a radioactive isotope ([latex]^{32}P[/latex]) or a fluorescent/chemiluminescent molecule. The membrane is incubated with this probe, which hybridizes (forms a double helix) only with its complementary DNA fragment on the membrane. After washing away any unbound probe, the location of the hybridized probe is detected, revealing a band that corresponds to the size of the DNA fragment containing the target gene.
ساوثرن بلوت
(إذا كان التاريخ غير معروف أو غير ذي صلة، على سبيل المثال "ميكانيكا الموائع"، يتم توفير تقدير تقريبي لظهوره الملحوظ)
الصور والتنزيلات بالحجم الكامل متاحة فقط، ومجانية تمامًا، للأعضاء المسجلين.
> تسجيل الدخول <
