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सदर्न ब्लॉट

1975
  • Edwin Southern
Laboratory scene demonstrating Southern blot technique for DNA analysis in molecular genetics.

(यह छवि केवल उदाहरण के लिए बनाई गई है)

दक्षिणी धब्बा एक है तरीका यह तकनीक डीएनए के नमूने में एक विशिष्ट डीएनए अनुक्रम का पता लगाने के लिए उपयोग की जाती है। इसमें इलेक्ट्रोफोरेसिस द्वारा अलग किए गए डीएनए खंडों को एक फिल्टर झिल्ली पर स्थानांतरित करना और फिर लेबल किए गए डीएनए प्रोब द्वारा खंडों का पता लगाना शामिल है। यह तकनीक शोधकर्ताओं को आकार और अनुक्रम के आधार पर जटिल डीएनए मिश्रण में एक विशिष्ट जीन की पहचान करने में सक्षम बनाती है।

The Southern blot, named after its inventor Edwin Southern, is a powerful and specific method for detecting a target DNA sequence within a complex mixture of DNA. It was a foundational technique in molecular genetics before the widespread adoption of PCR and sequencing. The process is a multi-step procedure that combines size separation with specific molecular recognition. It begins with the digestion of the total genomic DNA sample using one or more restriction enzymes, which cleaves the DNA into fragments of varying sizes. These fragments are then separated according to their size by agarose gel electrophoresis. The gel now contains a smear of countless DNA fragments, sorted by length. The crucial next step is the transfer, or ‘blotting,’ of these separated DNA fragments from the fragile gel onto a more durable membrane, typically made of nitrocellulose or nylon. This is achieved through capillary action, which wicks a buffer solution through the gel and the membrane, carrying the DNA along with it and immobilizing it on the membrane’s surface. The DNA is first denatured into single strands so it can bind to the probe. The membrane now holds a faithful replica of the DNA fragment pattern from the gel. To find the specific gene of interest among the thousands of fragments, a labeled probe is used. This probe is a single-stranded piece of DNA (or RNA) that has a sequence complementary to the target gene and is tagged with a marker, such as a radioactive isotope ([latex]^{32}P[/latex]) or a fluorescent/chemiluminescent molecule. The membrane is incubated with this probe, which hybridizes (forms a double helix) only with its complementary DNA fragment on the membrane. After washing away any unbound probe, the location of the hybridized probe is detected, revealing a band that corresponds to the size of the DNA fragment containing the target gene.

UNESCO Nomenclature: 2406
आणविक जीवविज्ञान

Type

रासायनिक प्रक्रिया

व्यवधान

इंक्रीमेंटल

उपयोग

विशिष्ट/विशेषज्ञ

शगुन

  • डीएनए पृथक्करण के लिए जेल इलेक्ट्रोफोरेसिस
  • प्रतिबंध एंजाइमों की खोज
  • डीएनए संकरण सिद्धांतों की समझ
  • जांच उपकरणों के लिए रेडियोधर्मी लेबलिंग तकनीकों का विकास
  • नाइट्रोसेल्यूलोज झिल्ली बनाने की तकनीकें

आवेदन

  • जीन मानचित्रण
  • आनुवंशिक रोगों का निदान करना (उदाहरण के लिए, सिकल सेल एनीमिया)
  • जीन उत्परिवर्तन या पुनर्व्यवस्था की पहचान करना
  • फोरेंसिक डीएनए विश्लेषण (आरएफएलपी)
  • पितृत्व परीक्षण
  • जीएमओ में ट्रांसजीन का पता लगाना

पेटेंट:

NA

संभावित नवाचार विचार

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Related to: Southern blot, Edwin Southern, DNA detection, hybridization, DNA probe, RFLP, blotting, molecular biology, gene identification, electrophoresis.

ऐतिहासिक संदर्भ

सदर्न ब्लॉट

1960
1970
1973
1975
1979
1983
1988
1960
1967
1970
1975
1977
1983
1987
1990
Natural Killer cells in a laboratory setting, examining cytotoxicity mechanisms.

प्राकृतिक हत्यारा (एनके) कोशिका साइटोटॉक्सिसिटी

नेचुरल किलर (एनके) कोशिकाएं जन्मजात प्रतिरक्षा प्रणाली की साइटोटॉक्सिक लिम्फोसाइट्स हैं, जो वायरल संक्रमण और कैंसर के खिलाफ प्रारंभिक रक्षा के लिए महत्वपूर्ण हैं। टी कोशिकाओं के विपरीत, इन्हें पूर्व संवेदीकरण की आवश्यकता नहीं होती है। एनके कोशिकाएं "मिसिंग-सेल्फ" पहचान तंत्र के माध्यम से उन लक्ष्य कोशिकाओं की पहचान करती हैं और उन्हें नष्ट करती हैं जिनमें एमएचसी क्लास I अणु कम हो गए हैं - जो ट्यूमर और वायरस द्वारा अपनाई जाने वाली एक सामान्य प्रतिरक्षा बचाव रणनीति है - और परफोरिन और ग्रैनजाइम के माध्यम से एपोप्टोसिस को प्रेरित करती हैं।

(यदि तिथि अज्ञात है या प्रासंगिक नहीं है, उदाहरण के लिए "द्रव यांत्रिकी", तो इसके उल्लेखनीय उद्भव का एक अनुमानित आंकड़ा प्रदान किया गया है)

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